微针治疗系统比强脉冲光有更好的胶原沉积作用（摘译：lordhobo）

显示全部楼层 · 发表于 2011-4-10 08:24:25

微针治疗系统比强脉冲光有更好的胶原沉积作用（摘译：lordhobo）
原文：
Greater Collagen Deposition with the Microneedle Therapy System Than with Intense Pulsed Light
Dermatologic Surgery
SEONG-EON KIM et al South Korea
Early View

摘译：lordhobo

强脉冲光（IPL）被用于治疗毛细血管扩张、脱毛和色斑，现在在非烧灼性嫩肤治疗中也越来越流行。有数据表明IPL可以显著增加前胶原I和III同时显著减少间质金属蛋白酶（MMP）-1和MMP-2，证明IPL对真皮胶原重塑有益处，尽管IPL治疗需要受过训练和有经验的人操作且激光设备昂贵。

皮肤针治疗疤痕和皱纹是个有效的方法。皮肤针可以通过穿刺完成，尽管穿刺技术是用于经皮给药，穿刺和环钻也可以改善疤痕。皮肤针治疗可以断裂疤痕和皱纹中老的胶原丝，这可以促进去除损伤的胶原产生并立即诱导表皮下更多的胶原产生。多个微针在痤疮疤痕上滚动可以增加胶原和弹性蛋白量。使用滚动的微针的优点是表皮仍是完整的，最小化如激光重建等烧灼方法产生的风险。此外，微针治疗技术简单，显示可以立即改善。我们发现微针治疗17例痤疮疤痕患者后，8周内可以显著增加表皮和真皮皮下连接之间的超声距离，显示较好的临床效果（数据未显示）。IPL和微针治疗可能比烧灼方法有优点，但没有这2种技术之间的比较研究被报道。我们使用小鼠作为模型通过对胶原合成和皮肤厚度研究比较了IPL和皮肤微针改善痤疮疤痕的作用。

材料和方法

动物模型制备
44只10周大有印记控制区域的小鼠用于研究。它们喂的是标准饮食，住在温度为23℃、湿度为25%并且12小时亮、12小时暗的恒定环境中。小鼠分成3组：未治疗的对照组，IPL（Ellipse Flex，Danish Dermatologic Development）治疗组和微针治疗系统（MTS，0.5mm Dermaroller，Clinical Resolution，Brea，CA）治疗组。治疗前，所有小鼠用2mg/0.1mL的三溴乙醇腹膜内麻醉。小鼠背部用电动剃刀剃去毛发，然后用80%的巯基乙酸（Niclean Cream，IL Dong Pharm，Seoul，Korea）使它变裸。

治疗
18只小鼠背部皮肤外用冷却超声凝胶后使用能量为10.5J/cm2的IPL单次照射。IPL的波长范围从555到950nm。使用2个脉冲，脉冲持续时间2.5ms，延迟10ms。其他18只小鼠背部接受5遍MTS治疗（总计15次）。MTS含有192个距离为2.5mm的针。针的厚度为0.25mm，逐渐变为0.125mm细的尖部。IPL和MTS以3周为间隔进行3次治疗。

皮肤厚度测量
最后1次治疗后4周，背部皮肤的厚度用测径器（Mituyoto，Mituyoto Corp.，Kawasaki，Japan）测量。

显微镜检查
8只未经治疗的对照组小鼠和每个治疗组的4只小鼠用5mm直径钻孔器取皮肤样本进行显微镜检查。样本用10%福尔马林固定并用石蜡包埋。样本然后切片并用苏木精、伊红和马森三色进行染色。测量8只对照小鼠的表皮和皮下脂肪之间的距离与用测径器测量的皮肤厚度进行比较。

蛋白印迹分析
15只小鼠（每组5只）的皮肤活检样本放在冰冷的含有50mMTri-base（pH8.0）、150mM氯化钠、2mM乙二胺四乙酸、1%甘油、10mM氟化钠、10mM焦磷酸钠和蛋白酶抑制剂（0.1mM苯甲基磺酰氟化物、5g/mL的抑肽酶和5g/mL的亮抑蛋白酶肽）的均一化缓冲液中进行均一化处理。等量的萃取蛋白（30g）用8%到12.5%的十二烷硫酸钠聚丙烯凝胶电泳并形成硝酸纤维素膜。用5%的脱脂奶粉在氨丁三醇缓冲盐液（pH7.6）中封闭后，膜放在可检测前体并使小鼠、鼠和人来源的1:1000牛血清中的1型胶原成熟的抗COL1A1抗体（山羊多克隆；sc-8784，Santa Cruz Biotechnology，Inc.，Santa Cruz，CA）中4℃孵育过夜。膜然后进一步放在鼠抗山羊过氧化物酶结合抗体中孵育。膜用增强化学发光溶液（ECL试剂盒；Amersham Life Sciences，Buckinghamshire，UK）处理，信号用Image Reader（LAS-3000，Fuji Photo Film，Tokyo，Japan）捕获。为了检测每个泳道的蛋白量，膜用条形缓冲处理并用单克隆抗体抗β-肌动蛋白（Sigma-Aldrich，St. Louis，MO）作为探针。蛋白带用光密度测定法分析。

酶联免疫吸附试验
总胶原量被测定用于定量分析。根据产品说明使用Sircol 胶原试剂盒（Biocolor Ltd.，Belfast，Northern Ireland）。所有小鼠的真皮皮肤样本放在10mL的含有1mg每10mg组织残渣的0.5M乙酸中进行均一化处理。均一化的样本在4℃下轻轻震荡孵育24小时。离心后，100μL的上清液加到1mL的Sircol染料试剂中并混合30分钟以让试剂与蛋白结合。离心后，小球悬浮在1mL的碱试剂中，用450nm的分光光度计阅读吸光度。胶原浓度（μg/mL）被测定与标准化胶原作比较。

统计分析
数据用方差单向分析来分析。每2组比较用Tukey-Kramer多种比较检验。测径器测量的皮肤厚度和显微镜下真皮厚度之间关系用Spearman等级相关试验来分析。使用NCSS2007软件（NCSS，Kaysville，UT）进行统计分析。P＜0.05认为有统计学意义。所有数据表示为平均值±标准差。

结果

测径器测量的皮肤厚度和显微镜下真皮厚度之间关系
测径器测量的皮肤厚度大约2.4倍于显微镜下真皮厚度（相关系数=0.845，P＜0.05）（图1），所以在进一步的试验中代替了显微镜下真皮厚度。

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2011-3-23 11:34

MTS比IPL治疗有较大的皮肤厚度增加
最后1次治疗4周后背部皮肤的厚度用测径器测量。IPL治疗、MTS治疗和未治疗的厚度范围分别为860-1370μm、1060nm-1530μm和800-1100μm，平均值分别为1100.0±153.9、1266.1±121.6和910.0±90.9μm（P＜0.05）。所有的组都不同于其他组（图2）。

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MTS治疗组增加的胶原比IPL治疗组多
2个治疗组的真皮厚度都增加，特别是MTS。增加的染色和胶原在马森三色染色中厚度的增加（图3）说明胶原总量增加。每组的5个样本的I型胶原纤维水平用蛋白印迹分析测定。2个治疗组的α1链的I型胶原表达都比未治疗组要多，MTS治疗组比IPL治疗组更高（P＜0.05；图4）。

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同样的样本用酶联免疫吸附试验（ELISA）来定量分析胶原水平。IPL治疗后胶原水平范围从9.8到29.5μg/mL（平均19.2±4.6μg/mL），MTS治疗后胶原水平范围从12.9-53.3μg/mL（平均25.2±9.5μg/mL），而未治疗组的胶原水平范围从7.5到20.2μg/mL（平均12.7±3.3μg/mL），所有组之间都有显著差异（P＜0.05；图5）。

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讨论

MTS和IPL通过测径器测量都增加皮肤厚度（图2），MTS治疗组增加最大。显微镜下真皮厚度是胶原改变的真皮厚度的一种测量方法，但它需要皮肤活检和显微镜检查。显微镜真皮厚度与测径器皮肤厚度之间改变较大，有2.4倍差距（图1）。因此，用测径器测量皮肤厚度作为筛选方法可以代替显微镜真皮测量。微针可以增加痤疮疤痕中的胶原纤维和弹性蛋白。Sircol染料的ELISA分析显示未治疗和治疗组之间以及IPL治疗组和MTS治疗组之间有显著的不同（图5），证明MTS治疗组水平最高。真皮中有7种不同类型的胶原，具有不同的成份和抗原性，I型胶原和III型胶原分别是真皮网状层和乳头层的主要成份。其他类型的胶原在其他部位，例如II型胶原在软骨中，IV型胶原在基底膜，而VII型胶原在基底膜和固着性原纤维，可能与疤痕改善无关。I型胶原是成人皮肤中最突出的类型。使用蛋白印迹分析法分析有限数量的小鼠显示MTS增加I型胶原水平比IPL更多（图4）。总之，MTS比IPL更能增加真皮中的胶原沉积，说明MTS可能比IPL治疗疤痕更有效。转载请注明出自论坛@医学美容时讯 http://bbs.aesthetictimes.com/bbs/,本贴地址:http://bbs.aesthetictimes.com/bbs/viewthread.php?tid=9294